12 мая 2017 года на факультете ветеринарной медицины Гентского университета в Бельгии родился жеребец по кличке VICSI. Жеребенок был назван в честь двух важных методов, которые были использованы для достижения этой цели: витрификации и ИКСИ. Витрификация - это метод криоконсервации, при котором ооциты очень быстро охлаждаются, что приводит к образованию стекловидной структуры и предотвращает образование кристаллов льда, которые могут повредить ооцит. Для ИКСИ или интрацитоплазматической инъекции сперматозоида используется микроманипуляция для введения сперматозоида в ооцит. Ооциты гораздо более чувствительны к низким температурам, чем эмбрионы. Таким образом, этот отчет о витрификации ооцитов означает важный прорыв в области вспомогательной репродукции у лошадей.
VICSI является результатом исследований, проведенных на кафедре репродукции, акушерства и здоровья стада под руководством профессора Энн Ван Сум. Нерея Ортис Эскрибано, защитившая докторскую диссертацию по витрификации, сотрудничала с Кэтрин Смитс, научным сотрудником FWO и специализирующейся на ИКСИ.
Процедура от замороженной яйцеклетки до жеребенка
Яйцеклетки для этого исследования были аспирированы из яичников лошадей, собранных на скотобойне. Эти незрелые ооциты витрифицируют и хранят в жидком азоте в течение одной недели. После быстрого нагревания в инкубаторе проводили созревание ооцитов. Зрелые ооциты оплодотворяли методом ИКСИ и культивировали в инкубаторе в течение 9 дней. Полученный эмбрион был перенесен в матку кобылы-реципиента 20 июня 2016 года в Центре эмбрионов животных Диргаердерхоф в Нидерландах.29 июня 2016 г. ультразвуковое исследование подтвердило, что кобыла действительно беременна.
Теперь, как и эмбрионы, ооциты тоже можно хранить
Криоконсервация ооцитов предлагает несколько возможностей в ветеринарии. Ооциты можно хранить и транспортировать для исследований или для клинических целей. В будущем можно будет хранить ооциты от ценных кобыл, а не только эмбрионы. Это дает владельцу больше гибкости в выборе жеребца. До сих пор владельцу приходилось немедленно решать, какой жеребец будет использоваться для оплодотворения, так как ооциты не могли быть сохранены.
Большой потенциал, немного терпения
Кроме того, для сохранения генетики редких или находящихся под угрозой исчезновения пород лошадей или непарнокопытных, таких как зебры, замораживание незрелых ооцитов дает много возможностей. Однако требуется некоторое время, чтобы оптимизировать метод, который был разработан в контексте научных исследований, до уровня, допускающего практическое применение. В этом исследовании, которое будет опубликовано в Equine Veterinary Journal, только 34% витрифицированных ооцитов созрели, и только 5% инъецированных ооцитов развились в хороший эмбрион. При использовании свежих ооцитов скорость созревания составляет 60%, а 20% оплодотворенных ооцитов развиваются в эмбрион, который можно перенести кобыле.
Рождение VICSI - важный шаг на пути к этим практическим приложениям. В 2009 году на факультете ветеринарной медицины Гентского университета родился первый бельгийский жеребенок из пробирки SMICSI. В то время ИКСИ применяли только в исследовательских целях, а между тем этот метод применялся и в клинических целях. Ооциты генетически ценных кобыл забираются в клинике с помощью пункции яичников под контролем УЗИ (ovum pick up, OPU). Поскольку ооциты оплодотворяются с помощью ИКСИ, можно использовать сперму низкого качества или с ограниченным запасом. Затем эмбрионы культивируют в лаборатории и переносят кобыле-реципиенту. В этом году в результате совмещения ОПУ и ИКСИ на факультете ветеринарной медицины родилось несколько жеребят.
VICSI=работа в команде
Рождение VICSI является следствием плодотворного сотрудничества между ветеринарами, бельгийскими и иностранными исследователями, техниками и зоотехниками в отделении, а также ветеринарами из центров пересадки эмбрионов в Бельгии и за рубежом. Эта мировая сенсация - результат многолетней самоотверженности многих талантливых людей.