Число находящихся под угрозой исчезновения животных в последние годы увеличивается. По данным Международного союза охраны природы (МСОП), 1375 видов птиц классифицируются как находящиеся под угрозой исчезновения, и около 12% исчезающих видов являются птицами. Сохранение исчезающих видов является важной задачей для нашего следующего поколения в целях сохранения генетического разнообразия. Окинавский пастушок, эндемичный для северной части острова Окинава, является примером исчезающего (EN) вида птиц. Железная дорога Окинавы относится к категории EN в красном списке МСОП, поскольку ее отдельные номера оцениваются примерно в 1500.
В рамках клеточного сохранения исчезающих видов птиц наша группа инициировала проект первичной клеточной культуры, направленный на сохранение исчезающих видов птиц в Японии, таких как окинавская железная дорога. Однако первичные клетки нельзя культивировать бесконечно из-за клеточного старения и стрессов, вызванных культурой клеток. Чтобы преодолеть эти ограничения клеточной культуры, первичные клетки должны быть иммортализованы. Хотя иммортализованные культивируемые клетки полезны для различных функциональных анализов или анализа транскриптома, высокоэффективные и воспроизводимые методы иммортализации не были разработаны для клеток птичьего происхождения. Впервые мы ввели обезьяний антиген вируса 40T (SV40T) и вирус папилломы человека (HPV)-E6E7 в фибробласты, полученные из куриных и окинавских железных дорог (исчезающие виды). Однако ни гены SV40T, ни E6E7 не могли индуцировать бессмертие птичьих клеток.
Соответственно, мы попытались использовать недавно разработанный метод иммортализации, который включает коэкспрессию мутантных CDK4, Cyclin D и TERT (метод K4DT) в этих птичьих клетках. Клеточное деление до старения было значительно продлено с помощью K4DT, хотя метод K4DT не мог индуцировать эффективную иммортализацию в массовой клеточной популяции. В результате удалось получить иммортализованные клетки птиц с экспрессией K4DT. Мы пришли к выводу, что метод K4DT полезен для продления клеточного деления и иммортализации клеток птичьего происхождения.